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VIP会员企业 生产葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β葡萄糖苷酶的方法
对应类别: 化工、石油、冶金     所属地区:海南省 → 海口市
申请类别:发明专利 授权日期:2016-3-9
专 利 号:ZL201210141944.1 专利权人:中国热带农业科学院热带生物技术研究所
合作方式:专利权转让
电    话:zhangailian6@163.com
传    真:
邮政编码:
电子信箱:
联系地址:
网站地址:http://
项目介绍:

                  本专利成果介绍(附上图片展)

自然界的纤维素资源十分丰富,它的基本组成单元是葡萄糖。纤维素酶是由葡聚糖内切酶、葡聚糖外切酶和β-葡萄糖苷酶组成,它将纤维素水解为葡萄糖而广泛应用于饲料工业(家禽家畜的日粮),食品加工业(酱油酿造,啤酒生产,果蔬加工,茶叶加工和油料作物加工),制糖,食品添加以及洗涤行业(纺织品的清洗)等不同的应用领域对于纤维素酶的性质有不同的要求。例如,酿酒业(弱酸性,30),制糖(中性,30-50),美食(弱酸性至弱碱性,70-100),饲料添加(酸性至弱碱性,37),洗涤等行业(弱碱性至碱性,30-100)。本专利产品能水解纤维素生成葡萄糖(图1)。在pH 2.2-11范围内具有良好的酶活性,pH4-11的酶活性较高(图2;在30-100范围内有良好的酶活性,30-50的酶活性较高(图3。这些特性表明,本专利产品适合于上述多个行业应用。

在食物消化进程中,食物先经过口腔嚼(唾液的pH值大约为6.6-7.1,),然后进入胃。家禽家畜的胃酸的pH值约为1,进食后食物的pH将被中至pH3-4。胃酸为盐酸,其中含有胃蛋白酶。经过胃消化的食物进入十二指肠和小肠进行进一步消化吸收。小肠液的pH是弱碱性。作为家禽家畜饲料添加酶,必须具备耐酸和耐碱性的特性。当前的瓶颈是耐酸性纤维素酶匮乏,价格十分昂贵。图4模拟食物在家禽家畜胃内(麸皮++盐酸+胃蛋白酶+羧甲基纤维素+本专利产品,于37℃作用3小时)的实验结果。从图中可见,本专利产品能耐受家禽家畜进食后的胃内(pH3-4+胃蛋白酶)环境,酶活性良好。这一组结果表明,本专利产品适合作为家禽家畜的添加酶。

对于本专利产品的制备,建立了简单易行的生产工艺。

   

图1.纤维素酶水解羧甲基纤维素生成葡萄糖(DNS法测定)T1~T3:本专利产品(阳性),O1~O3:对照:毕赤酵母发酵产物(阴性)

图2.本专利产品pH耐受试验
不同pH环境中水解羧甲基纤维素生成葡萄糖
图中的数据来源于,将本专利产品加入不同pH缓冲液中,37℃作用1小时;分别加入等量羧甲基纤维素反应1小时;用DNS法于540 nm测得的OD值。在pH2.2-11范围内具有良好的酶活性酶,pH4-11的酶活性较高。

图3.本专利产品的温度稳定性
80
图中的数据来源于,将本专利产品加入不同温度中作用1小时(其中的100℃的作用时间是30分钟);分别加入等量羧甲基纤维素,反应1小时;用DNS法于540 nm测得的OD值。
100
在30-100℃范围内都有良好的酶活性。30-50℃的酶活性较高。

图4.模拟食物在家禽家畜胃内环境【麸皮+水+盐酸+胃蛋白酶(60U/mL)+羧甲基纤维素+本专利产品,在37作用3小时】,用DNS法于540 nm测得的OD值;pH6.4(对照,胃外环境):麸皮+水+胃蛋白酶+本专利产品+羧甲基纤维素。以上结果表明,本专利产品能耐受家禽家畜进食后的胃内环境,酶活性良好。

 

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