| 项目介绍： 水解淀粉的酶是一组市场上需求量最大的酶，这些酶主要是异淀粉酶，a淀粉酶和葡萄糖淀粉酶( 糖化酶)。在天然的淀粉质原料中，支链淀粉的含量约占70%~100%，而直链淀粉的含量≦30%。异淀粉酶能专一性地分解支链淀粉中分支点的α- 1，6糖苷键，将支链淀粉转化为直链淀粉，因此又称为脱支酶；α-淀粉酶从淀粉分子内部切开α-1，4糖苷键，将淀粉液化；葡萄糖淀粉酶则催化淀粉水解为葡萄糖，它主要是水解直链淀粉的α-1.4糖苷键，能水解α-1，6糖苷键，而水解α-1，6糖苷键比速率仅为作用于α-1，4糖苷键的0.2%。图1展示本专利产品具有液化淀粉功能；图2和图3说明，由于含有异淀粉酶对淀粉脱支和含有α-淀粉酶对淀粉的液化作用，促进葡萄糖淀粉酶对淀粉的水解。
水解淀粉的酶被应用于多个领域，而不同的应用领域对其酶的理化性质要求不同。例如，酿酒业（弱酸性，30℃），制糖（中性，30-50℃），美食（弱酸性至弱碱性，70-100℃），饲料添加（酸性至弱碱性，37℃），洗涤等行业（弱碱性至碱性，30-100℃）。本专利产品具有水解淀粉生成葡萄糖的作用（图4）；pH耐受性试验如图5所示，在pH2.2-11范围内有良好的酶活性，pH4-10的酶活性较高；在30-100℃具有良好的酶活性，30-70℃的酶活性较高（图6）。这一组结果说明本专利产品适合于上述各个行业的应用。
随着家禽家畜饲养业的发展，饲料添加酶的需求量日益增大。在食物消化进程中，食物先经过口腔嚼（唾液的pH值大约为6.6到7.1，），然后进入胃。家禽家畜的胃酸的pH值约为1，进食后食物的pH将被中和至pH3-4，家禽家畜进食至饱食状态时，其胃内容物约为pH4。胃酸为盐酸，其中含有胃蛋白酶。经过胃消化的食物进入十二指肠和小肠进行进一步消化吸收。小肠液的pH弱碱性。综上所述，作为家禽家畜饲料添加酶必须具备耐酸和耐碱性的特性。当前的瓶颈是耐酸性水解淀粉的酶十分匮乏，价格十分昂贵。图7是模拟食物在家禽家畜胃内(麸皮+水+盐酸+胃蛋白酶+淀粉+本专利产品，于37℃作用2小时)的实验结果。从图中可见，本专利产品能耐受家禽家畜进食后的胃内（pH3-4+胃蛋白酶）环境，酶活性良好。这一结果表明，本专利产品适合作为家禽家畜饲料的添加酶。
对于本专利产品的制备，建立了简单易行的生产工艺。
图2．在2％的糯米平板上30℃作用12小时水解糯米（100％支链）淀粉右边3个点为本专利产品（水解完全），左边3个点为糖化酶对照（水解不完全，点中残留大量与碘结合的淀粉）
图3．本专利产品在3％的木薯淀粉平板上30℃作用12小时水解木薯淀粉
右边3个点为本专利产品（水解淀粉圈透明）,
左边3个点是糖化酶对照（水解淀粉圈不透明，即有淀粉残留）
图4．水解淀粉生成葡萄糖（用DNS法测定）
T1~T3：本专利产品（阳性）,O1~O3: 对照：阴性对照
图5．本专利产品pH耐受试验
在不同pH环境中水解淀粉生成葡萄糖
图中的数据来源于，将本专利产品加入不同pH缓冲液中，37℃作用1小时；分别加入等量可溶淀粉反应1小时；用DNS法，于540 nm测得的OD值。在pH2.2-11范围内具有良好的酶活性，pH4-10的酶活性较高。
图6．本专利产品的温度稳定性
图中的数据来源于，将本专利产品加入不同温度中作用1小时（ 其中的100℃的作用时间是30分钟）；分别加入等量可溶淀粉，反应1小时；用DNS法，于540 nm测得酶活性。
在30-100℃范围内都有良好的酶活性，30-70℃的酶活性较高。
图7．模拟食物在家禽家畜胃内环境【麸皮＋水＋盐酸＋胃蛋白酶（60U/ml)＋淀粉＋本专利产品，在37℃作用2小时】, 用DNS 法，于540 nm测OD值；pH6.4（对照，胃外环境）：麸皮＋水＋胃蛋白酶＋本专利产品＋淀粉。以上结果表明，本专利产品能耐受家禽家畜进食后的胃内环境，酶活性良好。 |
生产重组混合异淀粉酶、α淀粉酶和葡萄糖淀粉酶